Что такое фрагментация ДНК спермограммы

Методы коррекции фрагментации ДНК сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием в браке

*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ

Журнал входит в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК.

Читайте в новом номере

В настоящее время нарушениям отцовского генома уделяется все большее внимание в репродуктивной медицине. Особенно актуальна оценка дополнительных параметров эякулята, в частности фрагментации ДНК сперматозоидов.
Цель исследования: определить диагностическую ценность дополнительных спермальных тестов у мужчин с нарушениями фертильности при варикоцеле, их взаимосвязь с показателями спермограммы, а также определить влияние оперативного метода лечения на уровень фрагментации ДНК сперматозоидов.
Материал и методы: в исследование включено 60 человек с бесплодием в браке и левосторонним варикоцеле II степени. После проведенного обследования все пациенты подвергались варикоцелэктомии по методике Мармар. Пациенты 1-й группы в послеоперационном периоде спермопротективную терапию не получали. Пациентам 2-й группы с 1-го дня после операции назначен препарат Андродоз по 2 драже 2 р./сут в течение 6 мес. Оценка спермограммы и дополнительных спермальных тестов проводилась до операции и через 6 мес. после операции.
Результаты и обсуждение: в ходе исследования отмечен, наряду с нарушением основных показателей спермограммы (по рекомендациям ВОЗ, 2010), повышенный уровень фрагментации ДНК. Оперативное лечение по поводу варикоцеле может приводить к улучшению состояния ДНК сперматозоидов, что позволяет увеличить шанс зачатия либо улучшить прогноз при проведении вспомогательных репродуктивных технологий. Оперативное лечение в комбинации с препаратом Андродоз оказало наиболее положительное влияния на основные показатели спермограммы и уровень фрагментации ДНК сперматозоидов.
Заключение: наша работа показала целесообразность использования дополнительных спермальных тестов, в частности определения уровня фрагментации ДНК, при обследовании мужчин с нарушениями фертильности. Оценивать уровень фрагментации ДНК сперматозоидов у больных с варикоцеле необходимо даже при нормозооспермии (по рекомендации ВОЗ, 2010), что позволит более полно оценивать способность к зачатию у данной категории пациентов.

Ключевые слова: варикоцеле, бесплодие, спермограмма, фрагментация ДНК сперматозоидов, Андродоз, репродуктивная медицина, спермальные тесты, эякулят, спермопротективная терапия, варикоцелэктомия.

Для цитирования: Неймарк А.И., Неймарк Б.А., Давыдов А.В. и др. Методы коррекции фрагментации ДНК сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием в браке. РМЖ. 2017;25(8):506-510.

Methods of correcting the fragmentation of sperm DNA in combination with varicocele in men with infertility in marriage
Neimark A.I. 1 , Neimark B.A. 1 , Davydov A.V. 1 ,. Nozdrache N.Av1, Borisenko D.V. 1 , Arkhipov D.O. 1 , Borisova O.G. 2 , Semenova N.A. 2

1 Altai State Medical University, Barnaul
2 «Mother and Child» Clinic, Barnaul

At present, violations of the paternal genome are receiving increasing attention in reproductive medicine. It is especially important to evaluate the additional parameters of the ejaculate, in particular, fragmentation of the sperm DNA.
The aim of the study was to determine the diagnostic value of additional sperm tests in men with fertility disorders in varicocele, their relationship to spermogram parameters, and to determine the effect of surgical treatment on the level of fragmentation of sperm DNA.
Patients and methods: The study included 60 people with infertility in marriage and left-sided varicocele of the second degree. After the examination, all patients underwent varicocelectomy using the Marmar technique. Patients of group 1, in the postoperative period did not receive spermoprotective therapy. Patients of group 2, were prescribed the drug Androdoz — 2 drops 2 times a day for 6 months beginning from 1 day after the operation. Evaluation of the spermogram and additional seminal tests were performed before the operation and 6 months after the operation.
Results and discussion: In our study we noted a violation of the main spermogram values (according to WHO 2010), along with an increased level of DNA fragmentation. Surgical treatment of varicocele can improve the state of sperm DNA, which increases the chance of conception, or improves prognosis in conducting the assisted reproductive technologies. Surgical treatment in combination with Androdoz had the most positive effect on the results of the main indicators of the spermogram and the level of fragmentation of the sperm DNA.
Conclusion: Our study showed the reasonability of using additional sperm tests, in particular the determination of the level of DNA fragmentation, when examining men with impaired fertility. It is necessary to assess the level of fragmentation of sperm DNA in patients with varicocele even with normozoospermia (according to WHO 2010), which will allow a fuller evaluation of the ability to conceive in this category of patients.

Читайте также:  Краска для омбре в домашних условиях обзор, полезные советы по выбору и технике окрашивания

Key words: varicocele, infertility, spermogram, fragmentation of sperm DNA, Androdoz, reproductive medicine, seminal tests, ejaculate, spermoprotective therapy, varicocelectomy.
For citation: Neimark A.I., Neimark B.A., Davydov A.V. et al. Methods of correcting the fragmentation of sperm DNA in combination with varicocele in men with infertility in marriage // RMJ. 2017. № 8. P. 506–510.

В статье приведены методы коррекции фрагментации ДНК сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием

Материал и методы

Только для зарегистрированных пользователей

Вся правда об ЭКО: эмбриологи «Мать и дитя»

ЭКО с историей от «первого лица»: индекс фрагментации ДНК сперматозоидов и успех ЭКО

«Если индекс фрагментации выше 27%, не торопитесь с программой ЭКО», — показывает клинический опыт Секира Анастасии Григорьевны, генетика, эмбриолога Красноярского центра репродуктивной медицины «Мать и дитя», кандидата медицинских наук, которая также окончила аспирантуру по генетике и является автором 15 публикаций в специализированных сборниках и рецензируемых научных журналах.

«К настоящему времени известно, что для выявления нарушений мужской фертильности оптимальным является проведение различных исследований эякулята в комплексе. Так, например, при оценке спермограммы определяют количество и подвижность мужских половых клеток, МАР-тест позволяет выявить иммунологические нарушения у мужчины, а при оценке строгой морфологии видны нарушения строения сперматозоидов.

Кроме того, существуют и другие, относительно новые, но чрезвычайно информативные методы оценки сперматозоидов. Одним из таких методов является тест на фрагментацию ДНК, с помощью которого можно определить степень разрывов в молекуле ДНК спермиев, что часто приводит к остановке развития эмбриона на любом сроке.

Помимо этого, установлено, что в семейных парах, где у мужчин наблюдается повышенный индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, выкидыши на ранних сроках (до 12 недель) встречаются намного чаще, чем в парах с нормальным индексом фрагментации.

Читайте также:  Психосоматика ангины причины возникновения, лечение

Своевременное обнаружение и дальнейшая коррекция с помощью специальной терапии увеличивает шанс наступления и нормального протекания естественной беременности, а также значительно повышает вероятность получить долгожданную беременность с помощью метода ЭКО с первой попытки. В Красноярском центре репродуктивной медицины анализ оценки фрагментации ДНК сперматозоидов выполняется с 2010-го года.

Однако хотелось бы остановиться на конкретной истории, в которой благодаря комплексному подходу к оценке эякулята, включая анализ ДНК-фрагментации, удалось достичь главной цели нашей клиники – рождения в семье здорового ребенка.

В 2010-м году в Красноярский центр репродуктивной медицины обратилась молодая супружеская пара, женщине – 31 год, мужчине – 29 лет. В данной семье беременность не наступала по причине мужского фактора, а именно — было снижено количество прогрессивно-подвижных сперматозоидов в спермограмме, МАР-тест отрицательный, 4% нормальных морфологических форм (по Крюгеру), индекс фрагментации ДНК – 39%.

По результатам комплексного исследования эякулята мужчине была предложена метаболическая терапия, которую супружеская пара проходить отказалась вследствие непонимания значимости данного лечения. Ведь супруги уже приняли решение — программа ИКСИ. А дополнительное лечение, как в то время думал мужчина, — «раскрутка на деньги и потеря времени».

В результате из 11 зрелых ооцитов оплодотворение наступило только у 4 клеток. На 5 сутки развития был выполнен перенос двух эмбрионов, а у двух других эмбрионов – остановка дробления. Беременность в первом лечебном цикле не наступила.

С учетом отрицательного результата лечебного цикла, мужчине снова была предложена метаболическая и антиоксидантная терапия, которая в дальнейшем была им успешно пройдена. Удалось скорректировать число морфологически нормальных форм сперматозоидов и индекса ДНК-фрагментации практически до нормальных значений (22%).

После лечения пара обратилась для проведения повторной попытки ЭКО+ИКСИ. Во второй попытке из 22 зрелых ооцитов оплодотворение наступило у 18 клеток, на 5 сутки развития был выполнен перенос двух эмбрионов хорошего качества (эмбрионы соответствовали сроку развития, хорошие морфологические характеристики бластоцист), дополнительно были эмбрионы и для криоконсервации.

Результат лечения – одноплодная беременность, роды произошли в срок, и наши пациенты стали родителями прекрасного мальчика. Но у этой истории было продолжение – позже в этой семье родилась еще и девочка (беременность в естественном менструальном цикле!).

Если индекс фрагментации ДНК-сперматозоидов до 15% — это норма, но если 27% и выше – не стоит торопиться с ЭКО, пройдите лечение, которое позволит скорректировать этот показатель до нормальных значений.»

Определение степени фрагментации ДНК сперматозоидов (Tunel, SCSA)

Фрагментация ДНК сперматозоидов, как один из факторов нарушения мужской фертильности, открыт не так давно — около 10 лет назад, и патофизиологические механизмы процесса фрагментации ДНК продолжают изучаться. Однако установлено, что показатель фрагментации ДНК сперматозоидов имеет определенное диагностическое и прогностическое значение в супружеских парах с нарушением репродукции.

Фрагментация ДНК сперматозоидов – это наличие одно- и двухцепочечных разрывов молекулы ДНК, нарушение целостности генетического материала сперматозоида. Именно в этой молекуле закодирована и хранится вся генетическая информация, которая при зачатии передается ребенку. И чем больше в молекуле ДНК таких разрывов, тем меньше вероятность оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом.

Причинами фрагментации ДНК могут явиться отклонения при образовании и созревании сперматозоидов, апоптоз (естественный процесс гибели, в результате которого сперматозоид распадается на отдельные части), воздействие вредных внешних факторов. Именно такое явление, как апоптоз объясняет, почему в сперме всегда есть сперматозоиды с разрывами ДНК.

Читайте также:  Чем вызывается потеря сознания и как с этим бороться - крупнейший российский интернет портал, посвя

У здоровых фертильных мужчин доля сперматозоидов с нарушенной целостностью ДНК составляет примерно 15%. У бесплодных мужчин доля сперматозоидов с фрагментированной ДНК может доходить до 30 %, а в отдельных случаях может подниматься и выше. На показателях спермограммы это обычно не сказывается, однако ряд исследований последних лет обосновывают наличие корреляции между концентрацией сперматозоидов в эякуляте и частотой разрывов ДНК сперматозоида.

Как фрагментация ДНК сперматозоидов влияет на фертильность?

  1. Снижается вероятность зачатия.
  2. Поврежденный сперматозоид может оплодотворить яйцеклетку, но в большинстве таких случаев уже на ранних стадиях эмбриогенеза могут начаться нарушения, и произойдет самопроизвольное прерывание беременности. Высоким уровнем фрагментированных сперматозоидов довольно часто обусловлено привычное невынашивание беременности.
  3. Проблемы могут возникнуть во время ЭКО или ИКСИ. Если будет использован сперматозоид с фрагментированной ДНК, то эмбрион может развиваться неправильно еще до его имплантации в полость матки, и попытки ВРТ с участием такого сперматозоида обречены на неудачу. Отмечено снижение и образования бластоцист, и частота наступления беременности.

Для определения степени фрагментации проводится специальный анализ — определение степени фрагментации ДНК сперматозоидов. Существует несколько методик этого анализа, обладающих практически одинаково высокой чувствительностью.

TUNEL метод. Это микроскопическое исследование спермы, цель его — обнаружить сперматозоиды с поврежденной ДНК и посчитать их количество.

SCSA — еще один метод анализа степени фрагментации ДНК сперматозоидов, основан на исследование структуры хроматина с помощью флуоресцентного ДНК-маркера. Окрашенные им сперматозоиды пропускают сквозь лазерный луч, который заставляет клетки светиться разными цветами, в зависимости от степени повреждения ДНК: зеленый – норма, желтый – умеренные дефекты, красный – критические изменения.

Правила подготовки:

  • Половое воздержание не менее 2 дней и не более недели. Оптимально – 3 суток до сбора эякулята.
  • В период подготовки не употребляйте алкоголь, не курите.
  • Избегайте перегревания (сауны, бани и т.д.) сроком в течение 72 часов.
  • Не принимайте лекарственные препараты, любые, в течение 24 часов, если врачом не указано обратное и нет угрозы жизни из-за прерывания терапии.
  • Исключите все физиопроцедуры и рентгенологическое обследование в течение 72 часов.
  • Не рекомендуется тестирование сразу же после перенесенного воспалительного заболевания с повышением температуры. Исследование лучше перенести.
  • Накануне исследования исключите физические и эмоциональные перегрузки.
  • Правильно питайтесь в период подготовки, питьевой режим -1,5-2 литра в день.

Исследование проводится при концентрации сперматозоидов не менее 1 млн/мл и объеме эякулята не менее 1 мл.

По результату теста выдается протокол, в котором указан индекс фрагментации ДНК. Индекс отражает процентное соотношение между «здоровыми» и «больными» сперматозоидами.

  • индекс фрагментации не превышает 15% от общей численности сперматозоидов — вероятность наступления беременности естественным путем достаточно высока
  • индекс фрагментации повышен и находится в пределах от 15% до 30% — шанс естественного оплодотворения возможен, но снижен
  • индекс фрагментации от 30% до 50% — возможно оплодотворение с помощью ИКСИ или ЭКО
  • индекс фрагментации ДНК сперматозоидов равен 50% и более -даже при использовании репродуктивных технологий наступление беременности маловероятно.

Задать вопрос

Ссылка на основную публикацию
Что такое физраствор Польза физиологического раствора при ингаляциях
Какой раствор называют физиологическим Физиологическими называют такие растворы, которые по своему осмотическому давлению, ионному составу и значению рН близки к...
Что такое онкомаркеры и насколько можно им доверять
Анализ на онкомаркеры Рак — одно из самых опасных заболеваний известных медицине. На ранних стадиях его достаточно сложно обнаружить. Лечение...
Что такое Остеопороз — Советы пациентам
Что такое остеопороз позвоночника и как его лечить Остеопороз позвоночника – одна из самых тяжелых форм этого заболевания. При ней...
Что такое Флюс и как его правильно лечить
Лечение Флюса Многие люди испытывают панический страх перед посещением стоматолога. Часто бывает, что возникает зубная боль, а человек по понятным...
Adblock detector