Тромбоциты по Фонио метод подсчета, преимущества и недостатки

Подсчет количества тромбоцитов в крови — подробно о методиках

Когда нужен анализ крови с подсчетом тромбоцитов?

Клинический анализ крови с подсчетом тромбоцитов проводится в следующих случаях:

  • диспансеризация человека с проведением общего анализа крови для профилактики появления различных заболеваний;
  • симптомы повышенного количества тромбоцитов, вследствие которых может произойти закупорка сосуда (повышенное давление, онемение конечностей);
  • клинические проявления сниженного количества кровяных пластинок (постоянное появление синяков и гематом, бледность кожных покровов);
  • проведение повторного анализа, если первый тест показал нарушение.

Во всех перечисленных случаях необходимо обратиться к врачу для проведения общего осмотра. Он назначит методику, которая будет наиболее приемлемой для пациента, чтобы правильно поставить диагноз.

Методы подсчета тромбоцитов в крови

Выделяют три методики для подсчета кровяных пластинок в капиллярной крови:

  • использование камеры Горяева;
  • методика по Фонио;
  • использование полуавтоматического анализатора.

Все методики применяются в клинических учреждениях. Каждая из них имеет положительные и отрицательные стороны. Возможен подсчет тромбоцитов ручным методом для просмотра их формы и размера. Если врач будет сомневаться в точности результата, он может назначить подсчет клеток с помощью полуавтоматического анализатора.

Унифицированные методы подсчета тромбоцитов

Унифицированными является методики, которые считаются более точными. Для подсчета кровяных пластинок таким тестированием является методика по Фонио и применение камеры Горяева.

С помощью анализов можно не только почитать точное число клеток, но и изучить их строение. Возможно определение раковых атипичных клеток.

Ручной подсчет тромбоцитов в крови

К анализам с ручным подсчетом тромбоцитов относятся использование камеры Горяева и метода по Фонио. Для обоих исследований осуществляется подсчет тромбоцитов в мазке под микроскопом. Полученные цифры подставляют в формулу, с помощью которой результат из 1 мкл переводится на 1 л крови.

Подсчет тромбоцитов в камере Горяева

Для подсчета тромбоцитов по методике Горяева необходимо приготовить раствор, состоящий из следующих веществ:

  • реактив 1 (кокаина гидрохлорид 3 г, натрия хлорид 0,25 г, фурацилин 0,25 г, дистиллированная вода 100 мл);
  • Реактив 2 (раствор оксалата аммония 1%).

Чаще всего применяют раствор оксалата аммония. Он эффективно уничтожает эритроциты, возможен свободный подсчет кровяных пластинок.

Рекомендуется для исследования выбирать венозную кровь. При использовании капиллярной биологической жидкости повышается риск образования сгустка. Если произойдет агрегация тромбоцитов, корректный подсчет количества тромбоцитов будет невозможен. К крови добавляют раствор ЭДТА, который препятствует образованию сгустка.

В пробирку наливают 0,02 мл крови, добавляют 4 мл реагента 1 или 2. Получившуюся массу перемешивают. В течение 30 минут должен произойти полный гемолиз красных кровяных телец. Пипеткой отбирают полученную жидкость, добавляют в камеру Горяева.

Читайте также:  Как убрать целлюлит с помощью меда в домашних условиях просто и эффективно

Внимание! Для осаждения кровяных пластинок камеру Горяева с жидкостью помещают во влажную среду. Кладут счетную камеру под микроскоп и подсчитывают форменные элементы.

Тромбоциты считают в 25 больших квадратах. Для этого микроскоп перемещают слева направо, вниз, справа налево. Кровяные пластинки под микроскопом выглядят, как небольшие фиолетовые точки.

Полученное значение подставляют в формулу подсчета тромбоцитов в мазке:

X=a×250×200/25

  • X – число тромбоцитов на 1 мкл биологической жидкости;
  • a — количество тромбоцитов в 25 квадратах;
  • 200 – разведение крови;
  • 25- количество квадратов;
  • 1/250 – объем одного квадрата.

После завершения методики все используемые приспособления дезинфицируют с помощью этилового спирта.

Подсчет тромбоцитов в мазке крови (по Фонио)

Для методики используют капиллярную кровь, взятую из пальца. Ее помещают в капилляр, добавляют один из следующих реактивов, препятствующих образованию сгустка:

  • раствор ЭДТА 2, 6%;
  • раствор сульфата магния 14%.

Жидкость необходимо тщательно перемешать. Каплю разведенной крови добавляют на предметное стекло, размазывает пластиковым шпателем. Полученный мазок фиксирует с помощью метода по Романовскому-Гимзе.

Важно! Время фиксации зависит от применяемого реактива. Для ЭДТА оно составляет 40 минут, для сульфата магния — до 3 часов.

Мазок рассматривают под микроскопом, считают эритроциты и тромбоциты до получения значения, равного 1 тыс. Необходимо перемещать микроскоп слева направо, вниз, справа налево до тех пор, пока не будет достигнута данная цифра.

Для пересчета количество тромбоцитов 1 мкл на 1 литр крови число эритроцитов и тромбоцитов перемножают, делят на 1 тысячу.

Подсчет тромбоцитов в анализаторе

Для метода подсчета количества тромбоцитов используют капиллярную или венозную кровь. Добавляет антикоагулянт, чтобы она не свернулась. Если это произойдет, потребуется повторное изъятие биологической жидкости. Жидкость подносят к полуавтоматическому анализатору, который забирает объем жидкости, равный 1 мл.

Прибор самостоятельно подсчитывает данные, выдавая их на бланке исследования. Читайте о домашних анализаторах крови.

Какой способ подсчета тромбоцитов лучше?

С помощью подсчета показателя на мазке возможно визуально определить параметры клеток. Выявляется их размер, форма, патологические образования. Врач может ошибиться при подсчете или прокрасить мазок неправильно. В первом случае возможна постановка ошибочного диагноза. Для его подтверждения потребуется повторное исследование.

Внимание! Полуавтоматический анализатор в точности подсчитывает количество клеток, редко выдает ошибочный результат по этому параметру. Но аппарат не сможет рассмотреть параметры клеток, их атипичность.

Рекомендовано сначала проводить подсчет тромбоцитов вручную, затем исследовать их на полуавтоматическом анализаторе.

Ошибки при подсчете тромбоцитов

Возможны следующие ошибки в подготовительном этапе и проведении анализа:

  • отсутствие подготовки пациента в виде диеты, ограничения физической активности и времени сдачи исследования;
  • использование первой капли крови для проведения анализа (по правилам ее стирают водой, так как в ней содержится большое число форменных элементов);
  • отсутствие добавления антикоагулянта, который препятствует образованию сгустка;
  • ошибка в покраске мазка (использование просроченных или некачественных реактивов, укороченное или чрезмерно продолжительное время воздействие краски);
  • ошибки в подсчете клеток.

Для идентификации заболевания или его профилактики необходимо раз в год проходить обследование крови. Одним из тестирований является подсчет тромбоцитов. Для этого используют ручной подсчет или применение специализированного аппарата. Обе методики имеют плюсы и минусы, рекомендуется проводить их по очереди для подтверждения диагноза и отсутствия возможной ошибки. После получения данных обращаются к врачу. Только он сможет правильно расшифровать данные, назначив лечение при выявлении нарушений.

Читайте также:  Как снизить температуру ребенку народными средствами

Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro

Полезное видео

Методы определения тромбоцитов

Существует три метода определения количества тромбоцитов:

1) Подсчет тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой. Коэффициент вариации 25-30%

2) Подсчет тромбоцитов в мазке крови (по Фонио), Коэффициент вариации 10-15%. Достоинство – возможность оценить морфологические особенности тромбоцитов.

3) Определение количества тромбоцитов на гематологическом анализаторе,

коэффициент вариации 4-10%.

Метод подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой.

Принцип. Производится подсчет тромбоцитов в камере Горяева с применением в качестве разводящей и гемолизирующей жидкости раствора оксалата аммония. При подсчете используют фазовоконтрастную микроскопию.

Реактивы: 1 % раствор оксалата аммония.

Ход определения. Исследование можно проводить как в крови, полученной из пальца, так и в стабилизированной цитратом венозной крови. В последнем случае полученный при подсчете результат умножают на коэффициент 1,1 (учитывают разведение венозной крови раствором цитрата натрия – 9:1). Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках (не в меланжере). Для этого, в предварительно высушенную чистую силиконированную или пластиковую (полистирол) пробирку пипеткой отмеривают 1,98 мл 1% оксалата аммония и осторожно вносят в нее 0,02 мл крови. В течение 1-2 мин содержимое пробирки тщательно перемешивают без вспенивания. Заполняют две камеры Горяева и на 10-15 мин помещают их для оседания тромбоцитов во влажную камеру (чашку Петри со смоченной фильтровальной бумагой или марлей). В каждой камере подсчитывают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Фазовоконтрастная микроскопия проводится при помощи обычного микроскопа, осветителя типа ОИ-19 (или аналогичного) и устройства для наблюдения методом фазового контраста КФ-1 или КФ-4 [2].

Метод подсчета тромбоцитов в мазках крови (по Фонио)

Принцип. Метод основан на подсчете числа тромбоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов с расчетом на 1 мкл (или 1 л) крови, исходя из содержания в этом объеме количества эритроцитов.

Реактивы: Применяют 6% раствор этилендиаминтриацетата натрия (ЭДТА).

Ход определения. Смешивают кровь с раствором ЭДТА, для этого взятый капилляром Панченкова реактив до метки «75» вносят в пробирку, затем добавляют кровь, взятую до метки «0». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе в течение 30-45 минут (обычно окраска тромбоцитов занимает в 1,5 – 2 раза больше времени, чем окраска мазка для подсчета формулы крови). Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая тромбоциты в тонких местах препарата (эритроциты должны быть расположены изолировано). Подсчет производят следующим образом: в каждом поле зрения считают количество эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов.

Расчет: Количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов составляет А0/00. Зная число эритроцитов в 1 мкл (в 1 л) крови, легко подсчитать количество тромбоцитов в 1 мкл крови (в 1 л).

Читайте также:  Stent Thrombosis Management - Cardiac Interventions Today

Например. А=600/00 ; число эритроцитов 5 000000 в 1 мкл (5*106/мкл или 5*1012/л)

Х= 60*5*1000000/1000=300*1000 мкл (300*103/мкл или 300*109/л).

Определение количества тромбоцитов с помощью гематологического анализатора

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови, или гематологических анализаторов. Эти аппараты точны, и позволяют проводить экспресс-диагностику (определения выполняются за 1 мин).

Подсчет тромбоцитов проводят согласно инструкции к аппарату. Бюджетные модели гематологических анализаторов определяют только количество тромбоцитов, а более совершенные приборы содержат полный анализ тромбоцитарного звена, и позволяют говорить о морфологии тромбоцитов. Развернутый анализ тромбоцитов на анализаторе позволяет определить такие показатели:

РLТ – количество тромбоцитов.

Норма от 180-320109/л; При выходе за эти пределы необходима микроскопия мазка.

MPV – средний объем тромбоцитов. «Молодые» тромбоциты имеют больший объем. MPV увеличивается с возрастом. Норма: 8,6-8,9 фл у детей 1 – 5 лет; 9,5-10,6 фл у людей старше 70 лет.

PDV ширина распределения тромбоцитов по объему отражает степень анизоцитоза тромбоцитов. Норма = 14-18%.

РСТ – тромбокрит доля объема цельной крови, занимаемая тромбоцитами (аналогичен Hct). Норма = 0,15-0,40%.

Также гематологический анализатор строит график распределения тромбоцитов по размеру [5].

Сдать анализ тромбоцитов, анализ крови на тромбоциты, подсчет тромбоцитов по Фонио, тромбоциты по Фонио

Сдать анализ тромбоцитов, анализ крови на тромбоциты

Анализ на тромбоциты входит в состав общего анализа крови (клинического анализа крови). Сдать анализ можно в утренние часы натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Для анализа берется кровь из вены, в некоторых случаях возможен забор крови из пальца.

Пройти обследование можно любой из наших клиник. Мы работаем без выходных и праздников. Экспресс-анализы выполняются в будние и выходные дни от 1 часа.

Референсный интервал у взрослых мужчин и женщин зависит от лаборатории, в основном от 140-180 до 350-450 тысяч клеток /микролитр.

Снижение уровня ниже референсного интервала называется тромбоцитопенией. При выявлении тромбоцитопении назначаются необходимые дополнительные обследования, так как тромбоцитопения может быть связана с многими заболеваниями.

Уровень выше референсного интервала называют тромбоцитозов. Это состояние также требует дополнительных обследований.

Для расшифровки анализа обязательно обратитесь к врачу!

Подсчет тромбоцитов по Фонио, тромбоциты по Фонио в Лаборатории ЦИР

При выявлении тромбоцитопении или тромбоцитоза обязательно проводится оценка мазка крови под микроскопом по методу Фонио. Методика основана на подсчете числа этих клеток в окрашенном мазке крови на 1000 эритроцитов с пересчетом на 1 мл крови.

Во время подсчета тромбоцитов по Фонио исключается псевдотромбоцитопения, то есть ложное снижение уровня клеток, которое встречается в случае склеивания их между собой или наличия гигантских клеток. При оценке под микроскопом можно увидеть не только увеличенные клетки (макротромбоциты), но и микротромбоциты, анизоцитоз тромбоцитов (когда все клетки разного разного размера).

Методика подсчета по Фонио: в окрашенном мазке считают 1000 эритроцитов и все встретившиеся при этом тромбоциты. Так получают относительное число в промилле. Для вычисления абсолютного числа эту величину следует умножить на количество эритроцитов в 1 мкл и разделить на 1000.

Ссылка на основную публикацию
Трипофобия фото на коже человека
Трипофобия: симптомы и лечение этой фобии Любая фобия является психическим расстройством, поэтому их признают медицинские ассоциации, как болезненные состояния, влияющие...
Трематодные инфекции пищевого происхождения
Ученые нашли точный способ выявления паразитов-сосальщиков Ученые разработали метод точной диагностики описторхоза — это заболевание, вызываемое плоскими червями класса сосальщиков....
Трематодозы птиц простогонимоз птиц, эхиностоматидозы уток и гусей презентация, доклад
гельминтология Главная Гельминтозы Паразиты Лечение гельминтоза Лечение от паразитов Новости науки Добавить статью Блог Гельминтология: Паталогии человека: Классификация гельминтов и...
Трихинеллез распространенное заболевание собак и кошек
Трихинеллез (трихиноз) у человека ответы на основные вопросы ИНФОРМАЦИЯ ОБ ЭТОЙ ВЕРСИИ СТАТЬИ Дата последнего пересмотра: 04.11.2014 Объем: 6 страниц...
Adblock detector